Cromatometru lichid ultrarapidProminenece UFLC

Analiza rapidă a fost folosită întotdeauna ca un subiect tehnic important, dar, odată cu popularitatea rapidă a LCMS, creșterea raportului costuri a devenit o problemă urgentă și a devenit un factor important pentru accelerarea accelerării.
Analiza rapidă înseamnă scurtarea timpului de analiză, de obicei prin scurtarea coloanei cromatografice sau creșterea fluxului în faza de flux. Cu toate acestea, folosind coloanele de umplere frecvent utilizate cu dimensiuni de particule de 5 μm, performanțele de separare cu orice metodă scad semnificativ, ceea ce face ca accelerarea să piardă sens.
Prin urmare, au fost dezvoltate următoarele două metode:
• Utilizarea de umpluturi cu dimensiuni mici
Această metodă va face posibilă separarea rapidă. Cu toate acestea, datorită creșterii rezistenței la flux în coloana cromatografică, presiunea supusă componentelor instrumentului și coloanelor cromatografice va crește semnificativ.
• Separare la temperaturi ridicate
Temperaturile ridicate accelerează difuzia materiei, reducând în același timp rezistența la flux în coloana cromatografică și permitând separarea rapidă. Analiza la temperaturi ridicate este eficientă în reducerea presiunii coloanei, dar temperaturile ridicate provoacă deteriorarea coloanei cromatografice și provoacă descompunerea eșantionului și alte deficiențe care necesită atenție atunci când se aplică.
Pentru a rezolva problema de înapoi presiune, au fost dezvoltate instrumente speciale pentru îmbunătățirea capacității de suport la presiune, astfel de instrumente fiind de obicei mai scumpe. Cu toate acestea, aceste instrumente dedicate au trebuit să facă compromisuri în ceea ce privește performanța și sensibilitatea probelor. În plus, coloanele de umplere cu umplere prea subtilă, cu cerințe ridicate pentru hardware, metoda de analiză dezvoltată folosind această coloană cromatografică sacrifică versatilitatea. Prin urmare, dacă acest instrument este utilizat în analiza HPLC obișnuită, eficiența acestuia va fi scăzută.
Prominence suportă separarea rapidă
Utilizând componente standard, Prominence poate răspunde nevoilor cercetătorilor atât pentru analiza tradițională, cât și pentru analiza de mare viteză și poate suporta temperaturi de funcționare de până la 85 ° C, ceea ce face posibilă analiza rapidă la presiuni mai mici, în timp ce performanțele analitice și nivelurile de debit ale instrumentului sunt mai puțin frecvente chiar și în configurațiile mai scumpe.
Prominence UFLC suportă analiza rapidă prin următoarele caracteristici:
• Tuburile de coloane mici și bazinele de circulație cu volum mic reduc efectul de dilatare a vârfului din afara coloanei.
• Utilizați coloana cromatografică Shim-pack XR-ODS cu dimensiunea particulelor de 2,2 μm.
Shim-pack XR-ODS este o coloană de cromatografie rapidă de nouă generație care ia în considerare detaliile de umplere menționate mai sus și găsește un echilibru inteligent între eficiența de separare și presiunea pentru a îmbunătăți sau menține efectul de separare, scurtând în același timp timpul de analiză.

Chromatographic conditions; column: described above, mobile phase: water/acetonitrile (3/7,v/v), flow rate: described above, temperature: 40 ℃, detection: absorbance at 245 nm, sample volume: 4μL(XR-ODS), 10μL(VP-ODS).
Peaks; 1: actophenone, 2: propiophenone, 3: butyrophenone, 4: balenophenone, 5: hexanophenone, 6: heptanophenone, 7: octanophenone.
• Probator automat Prominence SIL-20A pentru o probă ultra-rapidă de 10 μl pentru 10 secunde.

Chromatographic conditions; column: Shim-pack XR-ODS(3mm i.d.×30 mm, 2.2μm), mobile phase: water/acetonitrile(4/6 to 2/8 in 0.4 min, convex gradient), flow rate: 3mL/min, temperature: 80 ℃, detection: absorbance at 245 nm, sample volume: 4μL(each 800 nm ol),.0.1 min delayed injection.
Peaks; 1: actophenone, 2: propiophenone, 3: butyrophenone, 4: balenophenone, 5: hexanophenone, 6: heptanophenone, 7: octanophenone.
• Suporta analiza la temperaturi ridicate de până la 85 ° C.
Temperatura și analiza rapidă: pe măsură ce temperatura coloanei crește, numărul de turnuri teoretice crește, eficiența coloanei crește și presiunea coloanei scade.

Chromatographic conditions;
mobile phase:　water/acetonitrile (3/7, v/v),
detection: absorbance at 245 nm.
Vârfuri: 1: Fenilacetonă 2: Fenilacetonă 3: Fenilacetonă 4: Fenilacetonă 5: Fenilacetonă 6: Fenilacetonă 7: Fenilacetonă
Efectul temperaturii asupra compușilor: analiza la temperatură ridicată este eficientă în reducerea presiunii coloanei, dar temperaturile ridicate provoacă deteriorarea coloanei cromatografice și provoacă descompunerea eșantionului și alte deficiențe care necesită atenție atunci când se aplică. Analiza la temperaturi ridicate este folosită doar ca un ajutor pentru analiza rapidă.
• Detector cu frecvență ridicată de eșantionare, care permite obținerea rapidă a datelor fără pierderea informațiilor.
• Software-ul de conversie a metodelor cromatografice dedicate, care face ca conversia condițiilor cromatografice obișnuite în condiții UFLC să fie ușoară și ușoară, asigurând versatilitatea metodelor de analiză.

Reproducibilitatea analizei rapide
Obținerea reproducibilității timpului de reținere a componentelor în separarea rapidă este mai dificilă decât în analiza obișnuită. Reproducibilitatea timpului de reținere (RSD) și înrădăcinarea pătrată a timpului cresc în proporție inversă, astfel încât este necesară o performanță de administrare a lichidului mai riguroasă decât analiza obișnuită. Prominence UFLC poate asigura o capacitate excelentă de administrare a lichidului cu o rezoluție de 3 nL/min și un răspuns de control de 0,1 secundă la administrarea gradientului, pentru o reproducibilitate extrem de superioară a timpului de reținere.

Ce este fluxul ridicat
Obiectivul cromatografiei lichide rapide este un debit ridicat, adică mai multe eșantioane sunt analizate în fiecare zi sau oră. Pentru a obține un debit ridicat, nu numai că trebuie să se scurteze timpul de analiză a probelor individuale, ci și întregul ciclu de preluare și analiză trebuie optimizat. Intenția accelerării nu este doar de a scurta timpul de analiză, ci și de a scurta ciclul de analiză. Prominence UFLC injectează eșantioane cu o viteză de 10 secunde, ceea ce scurtează considerabil perioada de analiză.

Exemple de aplicații

Analiza UFLC a aminoacizilor derivati din PTC

Există două metode de testare pentru analiza aminoacizilor, una fiind separarea coloanei de cromatografie cu schimb ionic, metoda de derivare post-coloană pentru detectarea derivativă, iar cealaltă este prima metodă de derivare post-coloană pentru separarea prin utilizarea coloanei de cromatografie inversă. Din punctul de vedere al analizei rapide, metoda de derivare pre-coloana a fost eficientă. Aici, analiza aminoacizilor a fost efectuată într-un timp mai scurt cu Shim-pack XR-0DS.
Se derivă utilizând izocianat de fenil. Derivarea post-coloana durează 1 oră, iar analiza de 25 de minute poate fi redusă la 4 minute atunci când se utilizează coloana cromatografică obișnuită.

Analiza UFLC a pigmentului

Pigmentii adăugați în alimente sunt compuși sintetici și compuși naturali, care sunt foarte solubili în apă și sunt analizați cu ajutorul HPLC. Dar atunci când mai multe combinații de coloranți sunt făcute, analiza în același timp este nevoie de mult timp. Aici se prezintă un exemplu de analiză simultană a pigmentului cu LC ultra-rapidă Shim-pack XR-ODS. Rezultatele analizei simultane a celor 12 coloranți componenti sunt prezentate în cromatografia de mai jos. Timpul necesar pentru analiza cu LC obișnuită este de 50 de minute, în timp ce cu LC ultra-rapid, analiza se termină în aproximativ 6 minute.

Analiza UFLC a hidrocarburilor aromatici policiclici (PAH)

PAH-urile sunt substanțe chimice care determină gradul de poluare a mediului cu gazele de epuizare, cum ar fi vehiculele. PAH-urile sunt puternic cancerogene, astfel încât monitorizarea atmosferică a acestor substanțe este un element important de măsurare. PAH-urile prezintă o fluorescență puternică și pot fi analizate cu o sensibilitate ridicată utilizând detectoare de fluorescență.
Pentru analiza acestor 10 PAH, în starea de separare fără pierdere, UFLC a realizat o analiză de 10 ori mai rapidă (timp de analiză de 5 minute) decât LC obișnuită (timp de analiză de 50 de minute).